微生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)之細(xì)菌的接種、分離、培養(yǎng)（十二）
發(fā)布時(shí)間:2021-12-19瀏覽：1472
根據(jù)細(xì)菌對(duì)氧與二氧化碳需要的情況，有以下幾種不同的培養(yǎng)方法：需氧培養(yǎng)法、厭氧培養(yǎng)法、微需氧培養(yǎng)法、二氧化碳培養(yǎng)法。
微需氧培養(yǎng)法 此法是介于需氧培養(yǎng)與厭氧培養(yǎng)之間的一種培養(yǎng)方法。有的細(xì)菌，例如彎曲菌為微需氧菌，需氧不多，無氧又不能生長(zhǎng)繁殖，要用微需氧培養(yǎng)法。
最佳的微需氧條件是5%O2、10%CO2、85%N2。
微需氧培養(yǎng)法有下列幾種：
（1）混合氣體法∶此法是利用厭氧菌培養(yǎng)罐進(jìn)行，罐蓋上應(yīng)具有雙相壓力計(jì)，可表示正負(fù)壓的。在裝進(jìn)接種過的培養(yǎng)基后，密封罐蓋。先抽去罐內(nèi)空氣至負(fù)壓 7.3×104 Pa（550 mmHg）處，輸入含5%02、10%CO2、85%N2的混合氣體，使罐內(nèi)壓力恢復(fù)至零。如此重復(fù)進(jìn)行一次。即可置于37℃培養(yǎng)。
（2）氣袋法∶這是利用厭氧菌簡(jiǎn)易培養(yǎng)袋進(jìn)行的方法。操作時(shí)只使用氣體發(fā)生管，不使用鈀粒催化劑管，使接種過的培養(yǎng)基在袋內(nèi)有微需氧環(huán)境，置37℃培養(yǎng)。
（3）雙平板法∶是用兩個(gè)平板培養(yǎng)基，其一接種已知的兼性厭氧菌、例如變形桿菌，另一接種樣品或菌種，去掉兩個(gè)平板的蓋子，將二者相對(duì)合齊，用膠布粘封密閉，再放進(jìn)密封不漏氣的容器內(nèi)，置37℃培養(yǎng)。此法是由兼性厭氧菌生長(zhǎng)的代謝作用，使小環(huán)境中的O2濃度下降和 CO2濃度上升，利用微需氧菌生長(zhǎng)繁殖。
（4）燭缸法∶是用磨口標(biāo)本缸或干燥缸進(jìn)行。將缸口與缸蓋接觸面涂勻凡士林，置入已接種的培養(yǎng)基，再放進(jìn)一小段點(diǎn)燃的蠟燭，蓋嚴(yán)密封。蠟燭在缸內(nèi)燃燒至自行熄滅，消耗了氧氣并產(chǎn)生 CO2，形成微需氧狀態(tài)，即可置 37℃培養(yǎng)。注意，燃燭要立穩(wěn)，若傾倒熄滅則耗氧過少，達(dá)不到微氧狀態(tài)。