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微生物實驗技術之消毒與滅菌(三十三)
發(fā)布時間:2022-01-25瀏覽:1254

一般情況下,蒸汽滅菌可用嗜熱脂肪芽孢桿菌的芽孢,干熱和環(huán)氧乙烷滅菌可用枯草芽泡桿菌(Bils subilis)的芽孢,短小芽孢桿菌(Boclus pumnilus)合適菌株的芽孢可用于輻射滅菌的監(jiān)測。

原始微生物孢子懸液的制備,要求有適當的制備程序,包括群體培養(yǎng),收獲和保護胞子的懸液。原始孢子懸液主要含有非活動性(非芽生)的孢子,一直保持在非營養(yǎng)性液體中。把生物指示菌放在含有培養(yǎng)液的包被中,該包被的設計要對滅菌基質的穿透力具有最低程度的抗性,特別是所用的生物指示劑要與快速滅菌蒸汽相接觸。在任何部位放置生物指示劑要注意位置,即直立、旁側、以確保滅菌基質的最大穿透力。生物指示劑的制備要保證它最初活孢子數及活孢子數對滅菌過程的抗力兩種功能。因此,要注意生物指示劑所含有的活孢子數及在有效期內活孢子的抗力。

每種形式的標準生物指示劑,對其應用都應有明確的規(guī)定。在使用生物指示劑過程中,要符合所規(guī)定的要求和條件,僅了解芽孢的抗性參數是不夠的,要證實在使用中所采用的條件及實際結果。

操作:一般是將生物指示劑放在熱力或氣體、射線滅菌最不易達到的部位,每次不應少于5片,上層和中層的中央部位各一片,下層前中后各1片,滅菌完畢,隨物品取出生物指示劑,以無菌操作,將包好的菌片取出,各加至含溴甲酚紫葡萄糖胨液體培養(yǎng)基1管,嗜熱脂肪芽孢桿菌在55~60℃培養(yǎng) 24~48h初步觀察,5天后判斷結果。如未長菌,判本批制品或物品滅菌合格。如有菌生長,可使培養(yǎng)基變酸,指示劑由紫藍色變黃色。若有1管長菌,判本批制品或物品滅菌不合格。