微生物檢驗-細菌計數(shù)（十八）
發(fā)布時間:2022-02-20瀏覽：1176
試管稀釋法（試管法、MPN 法）
1. 稀釋法原理 將未知菌量的供試液以一定倍數(shù)（如10倍）逐級稀釋后，取定量稀釋液分別接種數(shù)支（如5支）裝有固定量培養(yǎng)基的試管中，經(jīng)培養(yǎng)后，根據(jù)生長管數(shù)，按數(shù)理統(tǒng)計法判斷出含菌數(shù)量。
例如：10-2、10-3、10-4三級稀釋液，每級各接種5支，每支接種量1ml。經(jīng)培養(yǎng)后，生長情況為：10-2級全部生長;10-3級2支生長，3支未生長;10-4級全部不生長。生長細菌的管稱陽性管，不生長細菌的管稱陰性管。陰性管是由于其中未接種上細菌所致。從接種10-2、10-3、10-4三級稀釋液各5支，經(jīng)培養(yǎng)得陽性管數(shù)是5、2、0，據(jù)此可粗略推斷出供試液中含菌量是在102~103個/ml之間。
進一步應用數(shù)理統(tǒng)計法可計算出較精確的含菌數(shù)，稱為最大可能數(shù)（Most probable num-ber，簡稱 MPN）。
MPN 是建立在以下條件為基礎的統(tǒng)計數(shù)值，即：
①細菌不互相凝集、不相互排斥，隨機分散在被檢液體中；
②所用培養(yǎng)基應保證每個菌細胞皆可生長并在操作中不受污染；
③試管中的細胞分布符合 Poisson分布。
MPN 值、許多書中均有現(xiàn)成系列檢索表，按稀釋培養(yǎng)得到的陽性管數(shù)可直接查表。